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求助:水相分离

时间: 2012-05-23 03:30:09 作者: 来源: 字号:
我的课题是微生物发酵液的活性成分研究
发酵液首先过了个大孔树脂,取50%甲醇洗脱段进行下一步分离,进行了一步萃取工作,依次用石油醚,氯仿,乙酸乙酯,正丁醇萃取,发现有机萃取相都没有活性,剩余水相有活性,请问水相一般有什么东西,如何进行下一步分离,请有经验的师兄师姐们给予指导。
附:排除有机酸等一些离子化合物,这些东西我已经分完也没活性。TLC分析时一般的显色剂不能让其显色,如硫酸乙醇。


同意2楼的,水相重新上大孔树脂,梯度乙醇洗脱,分段检测下看

水相的成分一般很复杂,我做的是植物里面含有很多的皂苷类成分,不知道在微生物这里有没有,下一步的分离建议还是用打孔树脂,可以用不同梯度的乙醇溶液吸附和解析

我试过皂苷类的,硫酸乙醇应该显色吧,但是没有啊很头疼

水相一般都是蛋白质,多肽,多糖类,大分子化合物,,


但是过了大孔树脂大分子化合物不是已经分离除去了吗


还有一点 我用过茚三酮显色剂 不显色


茚三酮是检测糖类物质的,多肽呢,多肽是有活性的


可以排除蛋白质,但是多糖呢?
还有
正丁醇萃取后,剩余的溶液,你用甲醇溶解一下,分成甲醇溶,和水溶,在测一下活性,
最后经hplc分析一下,看看有什么物质出峰


这个我做过还是水溶有活性,什么物质出峰是什么意思?


那个多糖不也是大分子吗 过完大孔还会纯在吗?

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