有机酸是一类典型的可解离型有机化合物，通常具有较高的水溶性，它们的相对分子量处于几十～几百之间，因而色谱柱可以锁定在离子抑制色谱、离子对色谱或离子交换色谱，其中前两种用的均是反相色谱柱。
分析这类物质时，离子抑制色谱法是最常用的方法。
由于羧基的存在，有机酸的极性较强，为了使这类物质能被反相柱保留，流动相中会有较大比例的水，有时甚至用到100%水溶液；然而在水介质中有机酸会部分解离，每一种纯净物都会以两种甚至两种以上的形式存在，这是造成有机酸峰形变差的根本原因。
解决办法就是将流动相的pH值设定为酸性，以抑制羧基的解离，这样化合物以单一的未解离形式存在，疏水性增强，在反相柱上的保留也增大。pH值可参考解离性最强的有机酸的pK_a，通常流动相pH值比该化合物的pK_a小一个数量级，就能使每种化合物得到比较完美的峰形。
下面为迪马应用实验室做到一个具体应用：
迪马实验室 2012-06-06

基质：标准溶液
应用编号：101837
化合物：1. 草酸(Oxalic acid) 2. 酒石酸(Tartaric acid) 3. 苹果酸(Malic acid) 4. 乳酸(Lactic acid) 5. 乙酸(Acetic acid) 6. 柠檬酸(Citric acid) 7. 富马酸(Fumaric acid) 8. 琥珀酸(Succinic acid)
色谱柱：Inspire C18，150×4.6 mm, 5 μm (Cat#：81001)
流动相：25 mM KH2PO4, pH 2.5 流 速：1.0 mL/min
柱 温：室温
检测器：UV 210 nm 进样量：10 μL
文章出处：迪马实验室


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