在测黄酮含量的时候，用芦丁做标准品，发现在510nm都没有吸收峰，只有300多的地方有很多杂峰，我用的NANO2-AL(NO3)-NAOH法，是我的方法有问题么？如果是，那么具体的操作应该是怎么样的呢？哪位大侠能帮忙解答一下，不胜感激~[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]

自己顶一下

哪位大侠知道啊？

把浓度配低点试试

你可以试一下Alcl3显色法，显色后，芦丁的最大吸收峰大概在414nm左右


浓度是根据文献配的0.2mg/ml的还要再低点么


具体操作是什么样的呢？

你显色的顺序是什么？等待时间和加入量都对吗？
我也用你这个显色，但是没问题啊。

最近我也做这个，发现在500-510nm附近也没有最大吸收峰，而是在340-360nm有一些峰，最后在340nm下做标准曲线没有线性关系，而用文献中常用的500nm则得到很好的线性关系。
不知道这样的标准曲线可不可以作为黄酮的含量测定？

1.每次反应都要用空白较正(相同体积的溶剂代替样品,加等量的试剂于相同条件下反应)
2.从这两图看来,对照品跟样品吸收并不一致(可以与浓度过高有关),注意观察一下显色反应后对照品跟对样品是不是显一样的颜色(应显棕红至紫红色)?
3.还有就是要把浓度降低,吸光度控制在0.2-0.7之间,对照与样品吸光度越接近越好
4.要是浓度降低后样品对对照品吸收仍不一致,说明此方法不适合该样品的测定或应更换对照品,一般情况下对照品应先择样品中含有的成分(最好是含量较高的成分),对照品与样品最大吸收波长相差应小于5nm