最近在做蒲公英化学成分的制备，提取，过大孔树脂后，真空干燥后，上凝胶分离。样品水溶解，先5%甲醇水，后50%甲醇洗脱，旋干，收集样品。出现的问题

1.5%洗下来的很黑，水溶。东西多，估计不是好东西。
2.50%收集样品旋干后，加甲醇不容，放置后有沉淀，液相检测所要的那个化合物主要在50%洗脱液里，在制备制备液相 用样品时。发现样品很难处理，不容于甲醇、水及不同比例的甲醇水，崩溃撒！！！这个要怎么办啊！！
3.液相条件是355nm,0.2%30%甲醇水磷酸，到制备上改0.2%30%甲醇水后，355nm下反而检测到样品响应值非常小，由于用40%甲醇水溶解样品仍然有很多沉淀，我去了点样品上清液过膜后上制备，是不是样品处理的问题，那还是要解决样品的溶解问题。。。

用凝胶分段吗？我们都是到最后时用凝胶纯化一下
制备时样品溶解不好，我们一般是先加少量的DMSO将其溶解后，再用甲醇稀释，过滤膜进样。
化合物可能成酸性，看你在分析时用0.2%磷酸，酸性还挺强的，建议你分离时也用酸，可以用挥发性的酸，我们一般用三氟乙酸。
5%洗下来的有可能是鞣质，个人感觉。

上制备时改用甲酸！

话说gilson的制备真坑爹啊连个操作手册都没有。。。。

如果黄酮类物质含有的羟基数目多的话，羟基之间会产生分子内缩合，使其溶解度降低。按楼主的说法，旋干后不溶解在黄酮苷类物质中很常见。我也被坑了好多回，所以现在我们的样品都是冷冻干燥，坚决不旋成浸膏……

楼主大概确定下你的不容样品的极性吧，如果极性大的话，可以用50-60℃的热水溶解下试试，一般温度提高多少能溶解一部分，起码挽救些样品。如果极性不大可以考虑用用氯仿、丙酮等溶剂，一般来说氯仿对多数物质的溶解性还是挺好的。


现在的主要问题是，在液相上可以检测出来，到制备上检测不到东西，不知道为什么


额，这个是不是因为检测液相的灵敏度高，制备液相的灵敏度低，毕竟检测限有差别嘛。制备上的进样浓度加大试试


换了好多波长都不行，液相是10ul，制备进样是100ul。难道真是检测器灵敏度问题？！！！我一直以为两个的检测器差不多的啊。。。。


那加大样品浓度试试吧。按理说不应该这样的