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黄酮类化合物的HPLC分析

时间: 2012-06-28 06:57:16 作者: 来源: 字号:
花生衣中提取的黄酮类化合物,经液液萃取后(没过柱子,怕柱子会吸附一些物质)在高效液相上分离时,几个峰根本分不开,等度或者梯度都不行,流动相为甲醇-0.2%乙酸水,且出峰时间太快,3分钟左右,敬请各位帮忙分析一下

你的样品提取的方法没有说明,很可能问题出在哪里,流动相的问题不太大

用反相C18的话,把流动相极性加大,提高水的比例,出柱时间就长了


对不住你了,不知道按了什么不知道怎么发金币了。
样品用微波辅助提取,溶剂为甲醇,样品没有过柱子,就是液液萃取纯化了一下,要的甲醇和乙酸乙酯部分,我想这应该能行的通,也许东西太多极性太相近了

你如果用的是C18的话,分离黄酮流动相的酸性是不是太弱了,我都用磷酸做流动相的。


物质极性太大,开始梯度的时候(指3min以前),把甲醇的浓度加大,黄酮类成分分离技术一般比较成熟。可以下载一两篇黄酮类成分HPLC-DAD-ELSD方面的文章,里面的洗脱程序应该对你有帮助。

hplc 说着容易 找原因很复杂我建议你找个人带带你 你说的这种情况我觉得还是在样品处理上出了问题 因为本身液相仪说白了 常用的操作也就那么几种 找原因还应该在样品处理

我觉得问题还是出在流动相上,甲醇的比例低一些,出峰时间会变长,如果峰型差,流动相中可以加点酸。当然柱子也可能存在问题,如果柱子坏了,也起不到分离的效果了。

1.考虑柱子情况是否正常,柱温、基线情况。
2.提取时溶剂极性较大,分离纯化时对流动相极性需要试试,可以选择极性从小向大变化的几组实验,也可以考虑梯度洗脱。
3.可以先做做薄板摸摸基本条件,只从提取物极性角度分析对于液相很有帮助。
祝好运!!

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