大家用聚酰胺分黄酮，粗分时一般都用多少目的，10-30还是30-60？样品和填料的比例是多少呢，我现在有七八十克的样品，应该用多少填料呢？流动相是不是就是甲醇水或乙醇水啊？梯度要怎么设置啊？我是新手希望大家多多指教……



一般用粗一点的吧 不然容易堵柱子 样品填料比的话1：2的话差不多够吸附的了，洗脱的话估计50%以上的乙醇可以洗脱下来吧


我的东西极性比较大不知吸附严不严重，我在犹豫是用加水硅胶分段还是用聚酰胺富集，不知哪个能损失小一些



30-60的就可以，至少要1kg填料，用乙醇梯度洗脱。你可以先小试一下，再放大。

30-60算是比较粗的了，流动相据说氯仿甲醇强于乙醇水

如果是极性较大的样品，建议还是使用乙醇-水作为洗脱剂为好。至于洗脱梯度，可以依次以10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇进行洗脱。


我觉得这个更靠谱

可以使用10-30目的，但如果聚酰胺是新的，使用前要用乙醇和水多洗脱，
洗脱后的乙醇最好不要减压回收，因为10-30目的聚酰胺很多杂质，减压回收可能不能完全去除。
一般样品和聚酰胺的比是1：20，当然还需要做小试来试一下。
用不同浓度的甲醇乙醇都可以，但从环保的角度还是用乙醇洗脱较好，聚酰胺一般是不吸附样品的，实在担心就先做小试。
如果只是为了分段也可事实大孔树脂，聚酰胺上样量受限，虽说是分离黄酮，但有时还没大孔树脂有用。
不建议上硅胶粗分，硅胶加水就变成分配柱层析了，上样量也少了，而且流速慢，你的样品极性大有可能形成死吸附。