我最近在做黄芪中多糖的提取和含量的测定
1，多糖的提取中那位老师可以告诉我怎么样除去多糖中的色素？？（活性炭已经试过没有作用）急求合理的实验发放最好有文献。
2， 多糖的含量测定我用的的苯酚-硫酸法不知道自己提取出来的多糖是先水解完全的水解液进行含量的测定，还是直接拿粗糖样品直接进行测定！
请各位老师多多指教，真的很感谢！
本人做过两年的黄芪多糖研究，分享一下经验：
1.去除多糖中的色素问题
根本解决之道是过柱子，用大孔树脂柱进行净化，我们也是委托其他公司进行净化的，具体的净化工艺对方是保密的，我们委托方只能知道大致流程如下：多糖粗品加蒸馏水溶解成2.5%的溶液，超滤至保留体积为原体积的25~30%。保留液分别通过阳离子、阴离子交换层析柱，以醋酸-醋酸钠缓冲液洗脱。洗脱液经过微孔滤膜滤过，并超滤至保留液体积为原体积的10~15%。保留液浓缩，放至室温，加乙醇使含醇量为90%，边加边搅拌，离心，除去上清液。沉淀用乙醇反复处理，低温干燥，即得。
2. 多糖的含量测定
目前，我所摸索出来的最准确的方法是：
（1）用硫酸-苯酚法直接测定粗糖中的总糖量（以无水葡萄糖计）
我们摸出来的最佳方法如下：
对照品溶液的制备取在 105℃干燥至恒重的无水葡萄糖15mg，精密称定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，；精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密称定供试品10mg，置50ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，；精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置25ml量瓶中，精密加入5%的苯酚溶液1ml，再迅速精密加入浓硫酸5ml，边加边振摇，放置10分钟，置水浴中加热15分钟，取出，立即置冰水浴中冷却5分钟，取出，放至室温。另取水2.0ml同上平行操作，作为空白对照同时做空白试验校正，照紫外-可见分光光度法(附录26页)在490nm波长处测定吸光度，计算，即得。
注：a. 实验结束后，应将移液管、量筒、25ml量瓶等取用苯酚的量具浸泡于乙醇中，超声清洗30分钟，然后再用其他常规方法清洗。
b.苯酚要用新鲜未氧化的，如重蒸馏的或色标的。
（2）用碱性酒石酸铜试液滴定法测定总还原糖量（见中国药典2010版二部P490)
多糖量=总糖量—总还原糖量
现在黄芪多糖药学方面的文献质量大多不高，你查一查最近3年的文献看有没有好的，有很多东西是保密的，文献里不可能有，需要自己去找。
我也是提多糖的，我们去除多糖色素采用的方法是活性碳，但是用量得摸索出一定的比例，用少了是达不到效果的，我们用的是相当于粗提液的20%的量才出去色素的，你可以慢慢摸索一下，还有就是可以用壳聚糖吸附剂法，也可以除出去一部分色素，另对于其含量测定，我们用的是硫酸蒽酮法，测的是粗提液。
1，多糖的提取中那位老师可以告诉我怎么样除去多糖中的色素？？（活性炭已经试过没有作用）急求合理的实验发放最好有文献。
2， 多糖的含量测定我用的的苯酚-硫酸法不知道自己提取出来的多糖是先水解完全的水解液进行含量的测定，还是直接拿粗糖样品直接进行测定！
请各位老师多多指教，真的很感谢！
本人做过两年的黄芪多糖研究，分享一下经验：
1.去除多糖中的色素问题
根本解决之道是过柱子，用大孔树脂柱进行净化，我们也是委托其他公司进行净化的，具体的净化工艺对方是保密的，我们委托方只能知道大致流程如下：多糖粗品加蒸馏水溶解成2.5%的溶液，超滤至保留体积为原体积的25~30%。保留液分别通过阳离子、阴离子交换层析柱，以醋酸-醋酸钠缓冲液洗脱。洗脱液经过微孔滤膜滤过，并超滤至保留液体积为原体积的10~15%。保留液浓缩，放至室温，加乙醇使含醇量为90%，边加边搅拌，离心，除去上清液。沉淀用乙醇反复处理，低温干燥，即得。
2. 多糖的含量测定
目前，我所摸索出来的最准确的方法是：
（1）用硫酸-苯酚法直接测定粗糖中的总糖量（以无水葡萄糖计）
我们摸出来的最佳方法如下：
对照品溶液的制备取在 105℃干燥至恒重的无水葡萄糖15mg，精密称定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，；精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密称定供试品10mg，置50ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，；精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置25ml量瓶中，精密加入5%的苯酚溶液1ml，再迅速精密加入浓硫酸5ml，边加边振摇，放置10分钟，置水浴中加热15分钟，取出，立即置冰水浴中冷却5分钟，取出，放至室温。另取水2.0ml同上平行操作，作为空白对照同时做空白试验校正，照紫外-可见分光光度法(附录26页)在490nm波长处测定吸光度，计算，即得。
注：a. 实验结束后，应将移液管、量筒、25ml量瓶等取用苯酚的量具浸泡于乙醇中，超声清洗30分钟，然后再用其他常规方法清洗。
b.苯酚要用新鲜未氧化的，如重蒸馏的或色标的。
（2）用碱性酒石酸铜试液滴定法测定总还原糖量（见中国药典2010版二部P490)
多糖量=总糖量—总还原糖量
现在黄芪多糖药学方面的文献质量大多不高，你查一查最近3年的文献看有没有好的，有很多东西是保密的，文献里不可能有，需要自己去找。
我也是提多糖的，我们去除多糖色素采用的方法是活性碳，但是用量得摸索出一定的比例，用少了是达不到效果的，我们用的是相当于粗提液的20%的量才出去色素的，你可以慢慢摸索一下，还有就是可以用壳聚糖吸附剂法，也可以除出去一部分色素，另对于其含量测定，我们用的是硫酸蒽酮法，测的是粗提液。