最近在作一个植物的黄酮提取工艺，提取液用NaOH-NaNO2-Al(NO3)3显色后，在分光光度计扫描后，找不到最大吸收峰，确定不了最大吸收波长。这是怎么回事，请哪位指教一下，


补充一句：我的意思是想问，是不是提取液和标准品在显色后，最大吸收波长得一样，都在510nm处时才能测定黄酮含量？



你好，我做竹叶黄酮提取的时候都是以芦丁含量为指标计算黄酮含量的，所以扫紫外的时候也是直接扫的芦丁对照品的紫外，测定的时候直接以芦丁的最大吸收波长测。扫范围的时候波长范围的设定没有错吧，比如应在200-600扫。

的
你的样品显色后的最大吸收波长与芦丁的一致吗？
是不是必须得一样才能测含量？

NaOH-NaNO2-Al(NO3)3比色法出现假阴性是个客观事实，很多做黄芩、百蕊草总黄酮的文献都有报道，所以此法不行就换个方法吧。

的，请问为什么说这个方法不行呢？
是因为样品的波长与芦丁的不一样吗？
必须一样吗？

急求高手解答
是否显色后的样品与芦丁的紫外最大吸收必须一样？

理论上提取液和标准品都经过显色后（处理方法一致），测最大吸收波长基本是一样的（好像是相差不超过2nm），如果不一致的话只能说明你的样品含有杂质多，可能覆盖了你的目标物的波长吸收。

应该是看你所选的对照品，这也有关，不过二者波长差太多，肯定有问题了