小弟之前用芦丁做的标准品，使用亚硝酸钠硝酸铝显色反应，在500nm都有最大吸收峰，但是假如氢氧化钠后一直有红色絮状沉淀，严重影响含量测定。不去除沉淀测的的含量会很高，去除了以后含量又会很低。
之后想不用显色剂，直接用醇溶解后测量。但是直接用醇溶解，我的提取液最大吸收峰在280nm，而芦丁的最大吸收峰在360nm左右，这样的话应该就不能用芦丁做标准品做标准曲线了吧。

跪求答案
ps:是用紫外可见分光光度计



LZ应该先做一些文献工作，看看你的药材里含有哪种成分，是哪种黄酮成为主，不是所有的黄酮类成分都适合用芦丁做标品的，如果你的药材本身就不含芦西或黄酮醇类化合物（如含二氢黄酮或异黄酮），用芦西来做标品/亚硝酸钠硝酸铝是不科学的。
另外要调研一下药材里含有哪些易干扰的非黄酮类成分，比如加氢氧化钠成盐的会可能是哪些东西，然后可能设计一个分离方法（如大孔树脂）先剔除干扰成分再来测总黄酮。
这只是一个建议，LZ最好把你的药材说明一下。

你到底是用什么东西测的，紫外？


紫外。

自己顶下。。

可否用 AlCl3+kAc试试？

换一个标准品就行了，如淫羊藿苷。还可以查查文献，有关测总黄酮含量的文章很多。


用氯化铝的方法做了，在芦丁408nm有吸收峰的同时，我的药材提取液没有吸收峰啊，这个看来不行。
我就纳闷了，文献上都没有说用亚硝酸钠硝酸铝的方法有什么问题，为什么我做出来就会有红色絮状沉淀呢


我认真找了些文献，发现还真有不少用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH体系有絮状沉淀的现象，但是都是各有各的说法，解决办法也不尽相同。我准备去试试。猜测应该是提取液总黄酮中存在含有邻苯二酚羟基的黄酮类化合物，会在碱液中被氧化而成絮状沉淀。也许是跟我含量测定的溶剂全都采取60%乙醇有关。
另外我提取的是中药草珊瑚总黄酮，文献报道草珊瑚提取液中有些咖啡酸、绿原酸等可以在这个体系中500nm有吸收的情况，会影响最后含量测定的准确性。这个问题还无解中。

我发现我过大孔树脂柱后的干粉用乙醇溶解后，取少量溶在蒸馏水里，然后加氢氧化钠溶液，溶液是澄清的。
但是取少量用60%乙醇稀释后，加入氢氧化钠溶液，就出现了红色絮状的沉淀。
这是什么原因呢，哪位师兄师姐可知？