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用内标法测定血浆样品时标准曲线的制备方法,用蛋白沉淀法处理,

时间: 2011-02-01 17:29:23 作者: admin 来源: 未知 字号:
小弟想用内标法测定血浆中样品的含量,但对于相关标准曲线的标准曲线的制备方法不是很明白,我想用蛋白沉淀法处理血浆,是不是还要要氮气吹干,以及内标与血浆体积比为多少,希望做过的很明白的朋友指点一下 ,及相关的注意事项,谢谢

记得沉淀蛋白处理后是高速离心,取上清液进样,不过比较伤柱子,记得以前做生物等效性时一个药最起码用一根柱子。记得一般也就是用外标做的,萃取时才用内标。
如果用萃取的就需要用氮气把溶剂吹干后用流动相溶解进样,固相萃取除外。

沉淀蛋白,高速离心后取上清液进样,很容易赌柱子,柱压增高;用内标法可以消除提取方法中待测物因蛋白沉淀、溶剂稀释带来的误差。是否氮气吹干,取决于你待测物含量,如果比较高,可以不氮吹,氮吹后复溶主要是可以起到浓缩作用;内标与血浆体积以前在论坛见过,忘记了,我自己用的是1:15。希望有用!

此类样品通常必须用预柱,对柱子影响还是比较小的,要是液质联用,就不建议采用沉淀蛋白的方法。
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