最近柱分离几个东西都存在着极性相差太小,接液的时候两个点都下来了的情况。请问各位高手该如何是好啊? 我的东西用石油醚可以展开的。用纯石油醚冲洗两种物质一起出来了。 如果用凝胶柱该如何选择洗脱液啊?
老大,凝胶柱和硅胶柱分离原理不一样吧。
样品分子量区别在2倍以上才建议用凝胶柱,严格的凝胶过滤溶剂对分离结果是不会有影响的。你能确定两个物质分子量差别很大吗?
硅胶柱是用吸附层析原理的,改变流动相比例,就是改变流动相极性,会把不同极性大小的物质洗脱下来。
另外,Sephadex LH-20兼有凝胶过滤和吸附分配层析,所以选择合适的溶剂会把分子量有不同极性也不同的物质分开。
我建议将洗脱液极性再调小一些,分离出得产品如果含有少量得杂质的话,可以考虑一下采用重结晶的方法再提纯一下
顶一下2楼的 话
根据我的经验,我建议在选择柱子时要选择粗一点的柱子,硅胶要用薄层硅胶,装柱长度35cm就可以了.也可以尝试一下用制备薄层,如果有紫外就直接检测,如果没有紫外的话,可以把制备版裁下一点显色做对照
制备薄层可以解决
把柱子装的高一些,用细硅胶分离兴许能好一些,但也不一定,应为你的这个东西极性太小了。比石油醚极性小的溶剂试试吧,但好像也没有什么溶剂了,有的话可能比较贵吧。
各位了!!!!我提取的东西是油状的,不能重结晶。
老大,凝胶柱和硅胶柱分离原理不一样吧。
样品分子量区别在2倍以上才建议用凝胶柱,严格的凝胶过滤溶剂对分离结果是不会有影响的。你能确定两个物质分子量差别很大吗?
硅胶柱是用吸附层析原理的,改变流动相比例,就是改变流动相极性,会把不同极性大小的物质洗脱下来。
另外,Sephadex LH-20兼有凝胶过滤和吸附分配层析,所以选择合适的溶剂会把分子量有不同极性也不同的物质分开。
我建议将洗脱液极性再调小一些,分离出得产品如果含有少量得杂质的话,可以考虑一下采用重结晶的方法再提纯一下
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根据我的经验,我建议在选择柱子时要选择粗一点的柱子,硅胶要用薄层硅胶,装柱长度35cm就可以了.也可以尝试一下用制备薄层,如果有紫外就直接检测,如果没有紫外的话,可以把制备版裁下一点显色做对照
制备薄层可以解决
把柱子装的高一些,用细硅胶分离兴许能好一些,但也不一定,应为你的这个东西极性太小了。比石油醚极性小的溶剂试试吧,但好像也没有什么溶剂了,有的话可能比较贵吧。
各位了!!!!我提取的东西是油状的,不能重结晶。