请教一下sephadex LH-20用甲醇浸泡后上柱用什么溶剂啊
我想用甲醇-水剃度,一开始甲醇占多少呢,跑到什么程度可以换浓度呢
想十个百分点增加可行么
先了
我认为上凝胶柱尽量不要用混合溶剂来进行洗脱，
因为凝胶在不同的介质中它的溶胀系数不同。
只要是常做植化的人都知道凝胶柱跑梯度是很好的，甲醇水梯度增加最多也就15％吧，一般冲两个柱体积然后换梯度，效果不错的。不过流速一定要慢，3～4秒钟一滴最佳，上凝胶柱前千万别忘记过滤一下或者离心。祝你好远!
嗯
一般等度洗脱
柱子尽量长点
甲醇-水类似于反相系统, 甲醇比例越高洗脱越快
要想分离得比较细,甲醇比例不要太大,50%左右吧
流速尽量慢
对于Sephadex LH－20来说，甲醇和水的溶胀系数相差不大，可以走梯度，10～15％没问题，流速千万不能太快，柱子装的高点就可以。