柱子隔了一夜,阀门松了,液体都流干了,上层硅胶有开裂现象,请问柱子还能用吗,请高手指点。
如果是粗分的话,仅仅是上层干了,不算多的话,应该问题不大,加上洗脱剂,慢慢洗。就是刚开始可能会有气泡,流上一阵子就会好些了 最好重新装,否则在裂痕处扩散不均匀,分离效果很差。
重新装,保险一些
可以到点流动相,没过硅胶,然后用玻璃棒把硅胶搅起
应该不能搅的,你加压试一下看效果如何!实在不行只能重新装柱了
如果还没有上样品,当然是要重新装,或者搅起来,让它均匀沉降的。
如果已经上了样品了,那只能继续洗脱,在上面倒上溶剂,然后加压,冲的时间长了就恢复了,对分离效果有影响,可影响也不是太大。
同意楼上的意见,我也常常把柱子弄干,但是如果没有干得都裂了,应该不会有太大的问题,继续用洗脱剂冲,时间稍长久恢复的。
我的柱子也干过一次,不过是粗分,影响不大,可以继续冲。
我的柱子也干过一次,不过是粗分,影响不大,可以继续冲。
我都是干法上柱,每天吃个饭都要流干的,问题应该不大吧!!!
已经上样分离中的柱子中硅胶干了的话,只能继续加洗脱液,断层不是很大对粗分影响不会很大的!
可能硅胶柱流干,不是什么新鲜事情,我只是啰嗦几句:
1 对于粗分的样品,如果你想分离3个左右的点,那么柱子干了,肯定会影响到你样品的分离,你可能冲完后,会有一箩点,但是相对于色素、多糖等杂质而然,效果还是非常好的。
2 对于细分的样品,就算是干了,你也不要把溶剂比例马上加到最大,也要尽可能的细细冲柱,当然前提是你的时间允许;这时候要注意,细细的冲完,一定要在用最大比例的溶剂冲上2个柱体积,这样保证回收的完全,我的实验证明,断裂的硅胶柱成分始终要比正常的下的慢些,所以才有多冲的建议。
3 试验室责任问题,我们在做试验时,尤其是柱层析分离时,心里一定要有个数,多长时间能流完?多长时间要接个馏分?浓缩收集需要多长时间?溶剂比例如何调节?等等;下午下班后溶剂外流的预防措施,这是都是能想到办法解决的,所有试验都是需要用心来完成的。
怎么加压?
我觉得没有关系啊,干了就继续加溶剂进去冲吧
重装算了,毕竟不是大孔树脂,也别搅拌了,把色甙弄乱了
可能硅胶柱流干,不是什么新鲜事情,我只是啰嗦几句:
1 对于粗分的样品,如果你想分离3个左右的点,那么柱子干了,肯定会影响到你样品的分离,你可能冲完后,会有一箩点,但是相对于色素、多糖等杂质而然,效果还是非常好的。
2 对于细分的样品,就算是干了,你也不要把溶剂比例马上加到最大,也要尽可能的细细冲柱,当然前提是你的时间允许;这时候要注意,细细的冲完,一定要在用最大比例的溶剂冲上2个柱体积,这样保证回收的完全,我的实验证明,断裂的硅胶柱成分始终要比正常的下的慢些,所以才有多冲的建议。
3 试验室责任问题,我们在做试验时,尤其是柱层析分离时,心里一定要有个数,多长时间能流完?多长时间要接个馏分?浓缩收集需要多长时间?溶剂比例如何调节?等等;下午下班后溶剂外流的预防措施,这是都是能想到办法解决的,所有试验都是需要用心来完成的。
怎么加压?
用加压球加压。
赞一句,实验室责任
出去有事 可以关上的啊
有一个很好的办法,把柱子关了用泵在上面加压,气泡会慢慢消失的!经验之谈,记得加分啊,呵呵
出去有事 可以关上的啊
我在帮师姐洗柱子的时候,千强调,万嘱咐的就是柱子一定不能干!看来这是个问题啊!
请问一下阀门处干吗要涂凡士林呢?你不怕凡士林溶解,污染样品?
计划好了时间,这种情况应该不会怎么出现的
实在不行就先关掉好了
可能我的回答迟了,但是还是想和大家分享我的看法:
1.如果还没有上样,最好重新上柱子,没有必要将就着用干了的柱子,这样可以把对实验影响降低到最小。
2.如果已经上样了,为了不浪费样品,不得已,只能接着做。这样又有两种情况:
1)如果你知道你上的东西容易被某种特定比例的洗脱液冲下来,你可以用大量的洗脱液来冲,先尽量把柱子里面残留的东西冲出来,再重新上柱子。
2)如果没有办法全部冲下来,必须用这个干过的柱子,那么也有一个能让柱子“复活”的秘方。先把阀门修好,然后关紧,加入你配好的洗脱液,把柱子浸透,然后找一个洗耳球,把洗耳球当成一个锤子,一手握着洗耳球细的那个部位,轻轻地敲柱子(用洗耳球的球形部分解除柱子),哪里有气泡敲哪里。千万记住,敲的时候另一只手一定要把柱子扶稳。在敲击的时候你可以兴奋地看到,这种轻微的震动,使柱子里面的气泡一个一个往上冒。这种方法对于干的不多的柱子效果尤其好,可使柱子“起死回生”!就算干得比较严重,用洗脱液浸泡的时间长一点,敲的时间长一点也会出现令人惊喜的效果。再说一遍,敲的时候一定要扶稳柱子,一定要小心操作。
注意,能让柱子“起死回生”的办法也是到了万不得已的时候才用,最好的办法还是看好柱子,不要让柱子干,柱子干了总是不好的。
祝大家实验进展顺利:)
粗份,干了很正常啊,常有的事,在加上溶剂就是了!不过对分离的东西稍微有点影响,不能重装或是搅拌啊!这样就把已形成的色带就搞乱了!
干了柱子也不会死,分离有没有影响就看你那东西本身了,我们这干柱子正常,影响也不是很明显.干了照样分纯>>>
我的意见:假如是在洗脱过程中柱子干了,轻微干了,像zephyrqq所述,洗耳球敲击可以解决问题,干的比较多,而且是刚开始洗脱样品,直接倒出来,拿溶剂洗,浓缩,准备重新上样。如果是洗脱后期,那就把柱子反转,下面垫厚而有弹性的东西,按几厘米一段,倒出来,分别拿溶剂洗,洗脱液浓缩,点板检查,或者合并相同部分,或者重新上样。
没加样品可以重新装,或者可以用搅拌棒搅拌起来让它自然沉降;如果上样了最好不要搅拌也不能重新装,可以加流动相继续洗脱
2)如果没有办法全部冲下来,必须用这个干过的柱子,那么也有一个能让柱子“复活”的秘方。先把阀门修好,然后关紧,加入你配好的洗脱液,把柱子浸透,然后找一个洗耳球,把洗耳球当成一个锤子,一手握着洗耳球细的那个部位,轻轻地敲柱子(用洗耳球的球形部分解除柱子),哪里有气泡敲哪里。
我也试过的,还行吧。
没加样的最好重装,加样了,如果砍段,没事,继续冲柱;如果细分,我觉得不应让他过夜,成分容易扩散导致交叉,没办法冲下来重新上柱字!
如果色带很明显呢,就把柱子放空,空个半天,等溶剂稍微挥干,又不能全干,侧倒,然后用勺子按照各个色带挖出来,然后分别装小柱子洗脱,这样会好点。
主要柱子装得比较均匀结实,粗分细分柱子干了都没有影响,其实干法装柱一点也不比湿法装柱差!!!!!
还是那句老话,上样了 就跑吧。
没上就重装。
以后记住,最好不要干就行。
如果是粗分的话,仅仅是上层干了,不算多的话,应该问题不大,加上洗脱剂,慢慢洗。就是刚开始可能会有气泡,流上一阵子就会好些了 最好重新装,否则在裂痕处扩散不均匀,分离效果很差。
重新装,保险一些
可以到点流动相,没过硅胶,然后用玻璃棒把硅胶搅起
应该不能搅的,你加压试一下看效果如何!实在不行只能重新装柱了
如果还没有上样品,当然是要重新装,或者搅起来,让它均匀沉降的。
如果已经上了样品了,那只能继续洗脱,在上面倒上溶剂,然后加压,冲的时间长了就恢复了,对分离效果有影响,可影响也不是太大。
同意楼上的意见,我也常常把柱子弄干,但是如果没有干得都裂了,应该不会有太大的问题,继续用洗脱剂冲,时间稍长久恢复的。
我的柱子也干过一次,不过是粗分,影响不大,可以继续冲。
我的柱子也干过一次,不过是粗分,影响不大,可以继续冲。
我都是干法上柱,每天吃个饭都要流干的,问题应该不大吧!!!
已经上样分离中的柱子中硅胶干了的话,只能继续加洗脱液,断层不是很大对粗分影响不会很大的!
可能硅胶柱流干,不是什么新鲜事情,我只是啰嗦几句:
1 对于粗分的样品,如果你想分离3个左右的点,那么柱子干了,肯定会影响到你样品的分离,你可能冲完后,会有一箩点,但是相对于色素、多糖等杂质而然,效果还是非常好的。
2 对于细分的样品,就算是干了,你也不要把溶剂比例马上加到最大,也要尽可能的细细冲柱,当然前提是你的时间允许;这时候要注意,细细的冲完,一定要在用最大比例的溶剂冲上2个柱体积,这样保证回收的完全,我的实验证明,断裂的硅胶柱成分始终要比正常的下的慢些,所以才有多冲的建议。
3 试验室责任问题,我们在做试验时,尤其是柱层析分离时,心里一定要有个数,多长时间能流完?多长时间要接个馏分?浓缩收集需要多长时间?溶剂比例如何调节?等等;下午下班后溶剂外流的预防措施,这是都是能想到办法解决的,所有试验都是需要用心来完成的。
怎么加压?
我觉得没有关系啊,干了就继续加溶剂进去冲吧
重装算了,毕竟不是大孔树脂,也别搅拌了,把色甙弄乱了
可能硅胶柱流干,不是什么新鲜事情,我只是啰嗦几句:
1 对于粗分的样品,如果你想分离3个左右的点,那么柱子干了,肯定会影响到你样品的分离,你可能冲完后,会有一箩点,但是相对于色素、多糖等杂质而然,效果还是非常好的。
2 对于细分的样品,就算是干了,你也不要把溶剂比例马上加到最大,也要尽可能的细细冲柱,当然前提是你的时间允许;这时候要注意,细细的冲完,一定要在用最大比例的溶剂冲上2个柱体积,这样保证回收的完全,我的实验证明,断裂的硅胶柱成分始终要比正常的下的慢些,所以才有多冲的建议。
3 试验室责任问题,我们在做试验时,尤其是柱层析分离时,心里一定要有个数,多长时间能流完?多长时间要接个馏分?浓缩收集需要多长时间?溶剂比例如何调节?等等;下午下班后溶剂外流的预防措施,这是都是能想到办法解决的,所有试验都是需要用心来完成的。
怎么加压?
用加压球加压。
赞一句,实验室责任
出去有事 可以关上的啊
有一个很好的办法,把柱子关了用泵在上面加压,气泡会慢慢消失的!经验之谈,记得加分啊,呵呵
出去有事 可以关上的啊
我在帮师姐洗柱子的时候,千强调,万嘱咐的就是柱子一定不能干!看来这是个问题啊!
请问一下阀门处干吗要涂凡士林呢?你不怕凡士林溶解,污染样品?
计划好了时间,这种情况应该不会怎么出现的
实在不行就先关掉好了
可能我的回答迟了,但是还是想和大家分享我的看法:
1.如果还没有上样,最好重新上柱子,没有必要将就着用干了的柱子,这样可以把对实验影响降低到最小。
2.如果已经上样了,为了不浪费样品,不得已,只能接着做。这样又有两种情况:
1)如果你知道你上的东西容易被某种特定比例的洗脱液冲下来,你可以用大量的洗脱液来冲,先尽量把柱子里面残留的东西冲出来,再重新上柱子。
2)如果没有办法全部冲下来,必须用这个干过的柱子,那么也有一个能让柱子“复活”的秘方。先把阀门修好,然后关紧,加入你配好的洗脱液,把柱子浸透,然后找一个洗耳球,把洗耳球当成一个锤子,一手握着洗耳球细的那个部位,轻轻地敲柱子(用洗耳球的球形部分解除柱子),哪里有气泡敲哪里。千万记住,敲的时候另一只手一定要把柱子扶稳。在敲击的时候你可以兴奋地看到,这种轻微的震动,使柱子里面的气泡一个一个往上冒。这种方法对于干的不多的柱子效果尤其好,可使柱子“起死回生”!就算干得比较严重,用洗脱液浸泡的时间长一点,敲的时间长一点也会出现令人惊喜的效果。再说一遍,敲的时候一定要扶稳柱子,一定要小心操作。
注意,能让柱子“起死回生”的办法也是到了万不得已的时候才用,最好的办法还是看好柱子,不要让柱子干,柱子干了总是不好的。
祝大家实验进展顺利:)
粗份,干了很正常啊,常有的事,在加上溶剂就是了!不过对分离的东西稍微有点影响,不能重装或是搅拌啊!这样就把已形成的色带就搞乱了!
干了柱子也不会死,分离有没有影响就看你那东西本身了,我们这干柱子正常,影响也不是很明显.干了照样分纯>>>
我的意见:假如是在洗脱过程中柱子干了,轻微干了,像zephyrqq所述,洗耳球敲击可以解决问题,干的比较多,而且是刚开始洗脱样品,直接倒出来,拿溶剂洗,浓缩,准备重新上样。如果是洗脱后期,那就把柱子反转,下面垫厚而有弹性的东西,按几厘米一段,倒出来,分别拿溶剂洗,洗脱液浓缩,点板检查,或者合并相同部分,或者重新上样。
没加样品可以重新装,或者可以用搅拌棒搅拌起来让它自然沉降;如果上样了最好不要搅拌也不能重新装,可以加流动相继续洗脱
2)如果没有办法全部冲下来,必须用这个干过的柱子,那么也有一个能让柱子“复活”的秘方。先把阀门修好,然后关紧,加入你配好的洗脱液,把柱子浸透,然后找一个洗耳球,把洗耳球当成一个锤子,一手握着洗耳球细的那个部位,轻轻地敲柱子(用洗耳球的球形部分解除柱子),哪里有气泡敲哪里。
我也试过的,还行吧。
没加样的最好重装,加样了,如果砍段,没事,继续冲柱;如果细分,我觉得不应让他过夜,成分容易扩散导致交叉,没办法冲下来重新上柱字!
如果色带很明显呢,就把柱子放空,空个半天,等溶剂稍微挥干,又不能全干,侧倒,然后用勺子按照各个色带挖出来,然后分别装小柱子洗脱,这样会好点。
主要柱子装得比较均匀结实,粗分细分柱子干了都没有影响,其实干法装柱一点也不比湿法装柱差!!!!!
还是那句老话,上样了 就跑吧。
没上就重装。
以后记住,最好不要干就行。