请教各位高手关于C18反相硅胶的预处理、使用及保存方法的问题,有点不大清楚,请多指教!
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C18反相硅胶的预处理很简单,就是用甲醇浸泡即可。使用的时候,将C18
反相硅胶用甲醇混匀,搅拌,可以稍微超声脱气泡但不可时间太长,5分钟吧。然后匀浆装柱,用甲醇冲洗柱子2-3个柱体积,将C18中的交联剂之类洗掉,然后用你的洗脱剂冲洗主子2-3个柱体积。洗脱剂的选择可以根据液相也可以根据反相板。如果根据液相的话,需要将液相条件中的有机相减小10%作为洗脱剂为好。然后将你的带分离物质用洗脱剂溶解,上样,加洗脱剂冲就可以了。反相硅胶可以反复使用,使用次数增多以后,有可能在柱子顶端产生颜色很深的色带,可以选择用丙酮冲洗,如果洗不掉可以选择将其挖去,然后将主子内C18硅胶保存在甲醇中即可。注意不要甲醇干了。
cw0926!!
我们的那根C18柱上届的师兄们没保存好,后来我们去用的时候已经干了,现在再重新装柱试用了一下效果很不好,可能已经坏了吧
反相柱真的可以用丙酮冲洗么?以前不知道哦!
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C18反相硅胶的预处理很简单,就是用甲醇浸泡即可。使用的时候,将C18
反相硅胶用甲醇混匀,搅拌,可以稍微超声脱气泡但不可时间太长,5分钟吧。然后匀浆装柱,用甲醇冲洗柱子2-3个柱体积,将C18中的交联剂之类洗掉,然后用你的洗脱剂冲洗主子2-3个柱体积。洗脱剂的选择可以根据液相也可以根据反相板。如果根据液相的话,需要将液相条件中的有机相减小10%作为洗脱剂为好。然后将你的带分离物质用洗脱剂溶解,上样,加洗脱剂冲就可以了。反相硅胶可以反复使用,使用次数增多以后,有可能在柱子顶端产生颜色很深的色带,可以选择用丙酮冲洗,如果洗不掉可以选择将其挖去,然后将主子内C18硅胶保存在甲醇中即可。注意不要甲醇干了。
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我们的那根C18柱上届的师兄们没保存好,后来我们去用的时候已经干了,现在再重新装柱试用了一下效果很不好,可能已经坏了吧
反相柱真的可以用丙酮冲洗么?以前不知道哦!