求助：对于海藻酸钠/壳聚糖包合蛋白质的微粒系统中，测包封率用考马斯亮蓝染色法在595nm处测定蛋白质的吸光度，可实验中发现仅仅加入壳聚糖都能使得考马斯亮兰溶液由墨绿色变成蓝色，且在595nm处有吸收。使得没法用这种方法测包封率。请问大家遇到过这种问题吗？有知道什么原因的吗？或者推荐一个更好的方法，再此先大家了！
考马斯亮蓝跟蛋白中酸化后的氨基结合才会从墨绿色变成蓝色的，壳聚糖分子中也有一个氨基，所以在酸性条件下也会跟考马斯亮蓝结合，从而变色。
用海藻酸钠/壳聚糖包合蛋白质，要测包封率，真的很麻烦。用紫外，海藻酸钠跟壳聚糖会有干扰；用HPLC，在酸性流动相中海藻酸钠会形成水凝胶，这东西会堵柱子；用考马斯亮蓝又会有干扰。真想不到有什么好方法来测包封率了。

考马斯亮蓝跟蛋白中酸化后的氨基结合才会从墨绿色变成蓝色的，壳聚糖分子中也有一个氨基，所以在酸性条件下也会跟考马斯亮蓝结合，从而变色。
用海藻酸钠/壳聚糖包合蛋白质，要测包封率，真的很麻烦。用紫外，海藻酸钠跟壳聚糖会有干扰；用HPLC，在酸性流动相中海藻酸钠会形成水凝胶，这东西会堵柱子；用考马斯亮蓝又会有干扰。真想不到有什么好方法来测包封率了。

，我也是做壳聚糖蛋白质微球，采用福林-酚法测蛋白质含量的，也存在着壳聚糖对检测的干扰，请问老兄现在做出来没有，能否交流下？
！
我也做过类似的，确实有很大的干扰。但很多文献都用到这个办法。特别是用TPP做交联剂的时候。我想应该是因为TPP与大部分游离氨基反应所以降低了壳聚糖中的干扰。我后来就没用这种办法。我是用荧光来测游离药物的含量的。不知这种办法你们有没有试过