在做一个化合物时,用乙腈和0.1%的三氟醋酸走的梯度,色谱柱是全新的,才开始第一针峰型很好,走第二针开始就有变宽前延的趋势,用到第三次这个条件时,峰已经相当难看了,就像有两个峰一样,不知道是什么原因,望解答,谢谢!
TFA是强离子对试剂,可能色谱柱已经改性。
0.1%的三氟醋酸的pH 在1.5左右。对于大部分pH使用范围2~8的柱子来讲。。后果。。。。。。
峰变宽:柱效降低
峰前沿:柱流失---键合的固定相在pH 1 中脱落,保留所以变短
两个峰:柱流失到一定程度出现塌陷,所以是双峰。
解决办法:1.降低浓度
2.用FA(甲酸)替代TFA,色谱行为差距不大,0.1%的pH 在2.5左右
3.选择耐酸型色谱柱,液质中常用这种流动相,有专门的柱子。
0.1%的TFA我们常作为流动相来用,应该不会对柱子有很大的损害吧。我觉得主要还是要考虑化合物是否在这个条件下分析适合。有时候,稀释液也会对峰型有很大的影响。
我们也常用0.1%TFA的,还是考虑下,样品分离体系是否合适吧,要不换换碱性条件?
TFA是强离子对试剂,可能色谱柱已经改性。
0.1%的三氟醋酸的pH 在1.5左右。对于大部分pH使用范围2~8的柱子来讲。。后果。。。。。。
峰变宽:柱效降低
峰前沿:柱流失---键合的固定相在pH 1 中脱落,保留所以变短
两个峰:柱流失到一定程度出现塌陷,所以是双峰。
解决办法:1.降低浓度
2.用FA(甲酸)替代TFA,色谱行为差距不大,0.1%的pH 在2.5左右
3.选择耐酸型色谱柱,液质中常用这种流动相,有专门的柱子。
0.1%的TFA我们常作为流动相来用,应该不会对柱子有很大的损害吧。我觉得主要还是要考虑化合物是否在这个条件下分析适合。有时候,稀释液也会对峰型有很大的影响。
我们也常用0.1%TFA的,还是考虑下,样品分离体系是否合适吧,要不换换碱性条件?