急!!!
尝试以前的一个液相方法。流动相里有杂质,与主成分重在一起,为什流动相有杂质哦!!
条件: 220nm
1ml/min
流动相:缓冲液:2.1g庚烷磺酸钠+2000ml水
A:980ML缓冲液+10ml 甲醇+10ml乙腈 (磷酸调PH值2.0)
B:500ML缓冲液+250ml 甲醇+250ml乙腈(磷酸调PH值2.0)
27 和28分钟出2个杂质峰,换了2个厂家的庚烷磺酸钠,后一个是用于液相,纯度98%的,杂质少一些,但是也有这2个峰。
很郁闷,急!!!!
流动相里有杂质,在图谱上反应的是基线噪音很大,而不会出峰。原因:流动相里的杂质相当于是连续进样,当然也是连续出峰。鉴于你所说的这种情况,应是其他原因引起。
我觉得你走的是梯度吧?走过空白梯度吗?是空梯度里的峰吧?
哦忘记说了,走的就是梯度。进了一针甲醇,也出现这2个杂质峰,所以推断是流动相里的
可是庚烷磺酸钠不该出杂质峰吧???!!
庚烷磺酸钠以及磷酸比较容易出杂质,建议单独进针以排除此种可能
还就是流动相过滤所用到的滤膜,也可能造成鬼峰
你进甲醇出峰,怎么就判断是流动相里的峰,现在不说是庚烷磺酸钠的峰了?你只走空梯度看看,不进样,应该是梯度峰,这么低的波长,上这么大的有机相比例,不出峰才怪!
我也正遇到这样的问题,现在还没解决。我进水,甲醇、乙腈,在7min左右都有峰,进水该峰较小,甲醇、乙腈的话该峰就很大。不知道什么原因。现已换过水、甲醇、乙腈、色谱柱、仪器、不同批次的庚烷磺酸钠,仍未解决。现在打算买进口的庚烷磺酸钠试试。
现在有些怀疑是梯度洗脱引起的鬼峰了
什么怀疑呀?就是梯度出的梯度峰!
是不是进样部位污染了?
我曾遇到过类似情况,更换进口庚烷磺酸钠就没问题了。
你上面说的甲醇、乙腈、水、庚烷磺酸钠....等都是流动相用的吧,如果流动相的杂质,绝对不会出现单独的大峰,而应该是锯齿状的连续的小峰
我建议你更换一下制备供试品溶液用的有机溶剂(批号,厂家),现在国内生产的分析纯试剂啊,真坑爹,比如你如果是用甲醇的话,可以做个试验,从一开始就用进口的色谱纯甲醇来代替,不要心疼一点试剂,看看是不是制备样品时带进来的污染
还是没解决,估计考虑扣空白了
应该不是,做别的品种没问题
用到就是色谱级甲醇
尝试以前的一个液相方法。流动相里有杂质,与主成分重在一起,为什流动相有杂质哦!!
条件: 220nm
1ml/min
流动相:缓冲液:2.1g庚烷磺酸钠+2000ml水
A:980ML缓冲液+10ml 甲醇+10ml乙腈 (磷酸调PH值2.0)
B:500ML缓冲液+250ml 甲醇+250ml乙腈(磷酸调PH值2.0)
27 和28分钟出2个杂质峰,换了2个厂家的庚烷磺酸钠,后一个是用于液相,纯度98%的,杂质少一些,但是也有这2个峰。
很郁闷,急!!!!
流动相里有杂质,在图谱上反应的是基线噪音很大,而不会出峰。原因:流动相里的杂质相当于是连续进样,当然也是连续出峰。鉴于你所说的这种情况,应是其他原因引起。
我觉得你走的是梯度吧?走过空白梯度吗?是空梯度里的峰吧?
哦忘记说了,走的就是梯度。进了一针甲醇,也出现这2个杂质峰,所以推断是流动相里的
可是庚烷磺酸钠不该出杂质峰吧???!!
庚烷磺酸钠以及磷酸比较容易出杂质,建议单独进针以排除此种可能
还就是流动相过滤所用到的滤膜,也可能造成鬼峰
你进甲醇出峰,怎么就判断是流动相里的峰,现在不说是庚烷磺酸钠的峰了?你只走空梯度看看,不进样,应该是梯度峰,这么低的波长,上这么大的有机相比例,不出峰才怪!
我也正遇到这样的问题,现在还没解决。我进水,甲醇、乙腈,在7min左右都有峰,进水该峰较小,甲醇、乙腈的话该峰就很大。不知道什么原因。现已换过水、甲醇、乙腈、色谱柱、仪器、不同批次的庚烷磺酸钠,仍未解决。现在打算买进口的庚烷磺酸钠试试。
现在有些怀疑是梯度洗脱引起的鬼峰了
什么怀疑呀?就是梯度出的梯度峰!
是不是进样部位污染了?
我曾遇到过类似情况,更换进口庚烷磺酸钠就没问题了。
你上面说的甲醇、乙腈、水、庚烷磺酸钠....等都是流动相用的吧,如果流动相的杂质,绝对不会出现单独的大峰,而应该是锯齿状的连续的小峰
我建议你更换一下制备供试品溶液用的有机溶剂(批号,厂家),现在国内生产的分析纯试剂啊,真坑爹,比如你如果是用甲醇的话,可以做个试验,从一开始就用进口的色谱纯甲醇来代替,不要心疼一点试剂,看看是不是制备样品时带进来的污染
还是没解决,估计考虑扣空白了
应该不是,做别的品种没问题
用到就是色谱级甲醇