在注射剂的安全性实验中,大鼠被动皮肤过敏试验应如何测定蓝斑直径,是测量单个直径,还是测量大鼠身上所有的蓝斑直径,其方法如何操作!结果如何评价.
我现在正在做实验,急求各位回答!
谢谢!
色斑大小的测定可采用直接测定法或比色测定法。直接测定法是指取对照组和用药组两组的蓝色斑直径的平均值，计算出变化百分率。比色测定法是将蓝色斑片剪下，剪碎后加入丙酮-生理盐水（7:3）混合液5-6ml，浸泡后次日离心，在610nm波长处测定其吸收度。取两组的吸收度平均值，计算出变化百分率。
评价有两种方法，一种是呈阳性反应的最高稀释倍数的抗体效价为指标。另一种是固定的血清稀释倍数后以色斑的大小或光密度值为指标。直径在5mm以上者判定为阳性。应提供蓝斑照片。
谢了！欢迎各位老师指教！因为不是圆形如何测量蓝色斑直径？
新药指导原则上有明确的方法，与对照组比较，直径大于5cm为阳性。
一般结果蓝斑直径和皮内注射药物的浓度剂量有关，必须测量每个蓝斑直径，相同剂量组的计算平均直径。不是圆形的斑可分割计算面积再换算出直径不是很难吧？
是否只测量注射部位对应的皮内兰斑
只测量注射部位对应的皮内兰斑即可
大鼠PCA大家用的阳性药一般是什么？剂量是多少？
谢谢pony2,阳性药的牛血蛋白,卵蛋白等,具体剂量见指导原则
苦木注射液被动皮肤过敏试验
摘要
试验选用健康大鼠，制备各受试物IgE抗血清，致敏并攻击动物，测定动物皮肤蓝色反应斑直径。试验结果显示受试品被动皮肤过敏性反应阴性。
试验目的
观察苦木注射液的被动皮肤过敏性反应。
受试药物
苦木注射液（浓配液，含总生物碱0.75mg/ml），棕色透明液体，制药有限公司提供，批号：050205。临床用法用量：2ml/支（含总生物碱0.5mg），淡黄色透明液体，肌肉注射，一次2-4ml，一日1-2次，临床人用量为0.033mg/kg（以总生物碱计）。
试剂
0.9％氯化钠注射液，四川科伦药业股份有限公司生产，批号：20041022。
试验动物
健康Wistar大鼠48只，体重180－200g，雌雄兼用，由实验动物中心提供，动物合格证号：桂医动字第11005号。
动物饲养条件
空调控温，换气扇通风，光照12h/日，食固体混合饲料，饮自来水，按性别分笼群养，每天清扫笼舍一次，室温20-22oC，相对湿度50-60％。
试验方法
① 致敏：选取健康大鼠24只，随机分为4组，每组6只：苦木注射液大剂量组（1.125mg/kg）、苦木注射液小剂量组（0.56mg/kg）、阳性对照组（10％鸡蛋清液，0.15ml/100g）、空白对照组（0.9％氯化钠注射液，0.15ml/100g）。实验室适应饲养5天后开始试验，按无菌操作，苦木注射液组肌肉注射苦木注射液0.15ml/100g，阳性对照组同法注射新鲜10％鸡蛋清液0.15ml/100g，空白对照组同法注射0.9％氯化钠注射液0.15ml/100g。隔日致敏一次，共5次。
② 制备血清：各组末次致敏后10天，挖眼球采血，低速离心，制备抗血清，置冰箱备用。
③ 大鼠脱毛：选取健康大鼠24只，随机分为4组，每组6只：苦木注射液大剂量组（1.125mg/kg）、苦木注射液小剂量组（0.56mg/kg）、阳性对照组（10％鸡蛋清液，0.15ml/100g）、空白对照组（0.9％氯化钠注射液，0.15ml/100g）。实验室适应饲养5天后可以用来做试验。试验前一天，用10％硫化钠溶液（先用20％水溶解，再加乙醇至刻度）脱毛，对各组大鼠进行脱毛。
④试验过程：将各组含IgE的抗血清分别用生理盐水稀释成不同倍数（1：10，1：30，1：50稀释度），在动物背部脊柱两侧脱毛区用记号笔划直径1厘米，相距1厘米，左右对称的六个圈（见附图1），依次由前向后皮内注射各对应组的抗血清（见附图2），48小时后，各组动物进行抗原攻击，静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原（含0.5％的伊文思蓝染料）（见附图3），30分钟后将动物处死，剖取背部皮肤，铺平后测量皮肤内侧的蓝色反应斑直径，同时拍摄照片，结果见附图4（正常皮肤）、附图5（阴性组皮肤）、附图6（阳性组皮肤）、附图7（大剂量组皮肤）。
⑤ 评价方法：固定的血清稀释倍数后以色斑的大小为指标。
试验结果
苦木注射液组和阴性对照组均未出现被动皮过敏反应症状，而阳性组大鼠被动皮肤过敏反应症状明显，出现直径在5mm以上的蓝斑，呈阳性反应。试验结果见表4。
表4：苦木注射液对大鼠被动皮肤过敏反应蓝斑大小的影响
组别 动物数（只） 注射不同浓度血清各注射点的蓝色反应斑直径（mm）
浓度血清（1：10） 浓度血清（1：30） 浓度血清（1：50）
阴性组 6 0 0 0
阳性组 6 9.13±2.23 7.50±2.27 3.63±1.30
大剂量组 6 1.00±1.20 0.63±0.74 0.50±0.76
小剂量组 6 0.63±0.74 0.50±0.76 0.25±0.46
从表4可以看出，大剂量组高浓度血清蓝斑直径为1.00毫米，小于5毫米，阳性组在此浓度下血清蓝斑直径为9.13毫米，呈强阳性反应，说明该药被动皮过敏试验为阴性，临床应用安全。
结论
请问：不是圆形的斑如何分割计算面积再换算出直径呢？谢谢
如出现不规则图形，可将该图形分割为矩形、梯形、三角形等，分别按这些图行的面公式计算出面积，再相加起来，用圆的面积公式S＝πR2,计算出R，再用Rx2不就的到直径吗？
知道了，谢谢！
我前几天刚做过一遍,附个图看看:
问题？卵蛋白和小牛血清蛋白分子量很大，是否不容易透过血管壁，这样做为阳性药物如何激发PCA的阳性反应啊？ 2 1 2 下一页 尾页
我现在正在做实验,急求各位回答!
谢谢!
色斑大小的测定可采用直接测定法或比色测定法。直接测定法是指取对照组和用药组两组的蓝色斑直径的平均值，计算出变化百分率。比色测定法是将蓝色斑片剪下，剪碎后加入丙酮-生理盐水（7:3）混合液5-6ml，浸泡后次日离心，在610nm波长处测定其吸收度。取两组的吸收度平均值，计算出变化百分率。
评价有两种方法，一种是呈阳性反应的最高稀释倍数的抗体效价为指标。另一种是固定的血清稀释倍数后以色斑的大小或光密度值为指标。直径在5mm以上者判定为阳性。应提供蓝斑照片。
谢了！欢迎各位老师指教！因为不是圆形如何测量蓝色斑直径？
新药指导原则上有明确的方法，与对照组比较，直径大于5cm为阳性。
一般结果蓝斑直径和皮内注射药物的浓度剂量有关，必须测量每个蓝斑直径，相同剂量组的计算平均直径。不是圆形的斑可分割计算面积再换算出直径不是很难吧？
是否只测量注射部位对应的皮内兰斑
只测量注射部位对应的皮内兰斑即可
大鼠PCA大家用的阳性药一般是什么？剂量是多少？
谢谢pony2,阳性药的牛血蛋白,卵蛋白等,具体剂量见指导原则
苦木注射液被动皮肤过敏试验
摘要
试验选用健康大鼠，制备各受试物IgE抗血清，致敏并攻击动物，测定动物皮肤蓝色反应斑直径。试验结果显示受试品被动皮肤过敏性反应阴性。
试验目的
观察苦木注射液的被动皮肤过敏性反应。
受试药物
苦木注射液（浓配液，含总生物碱0.75mg/ml），棕色透明液体，制药有限公司提供，批号：050205。临床用法用量：2ml/支（含总生物碱0.5mg），淡黄色透明液体，肌肉注射，一次2-4ml，一日1-2次，临床人用量为0.033mg/kg（以总生物碱计）。
试剂
0.9％氯化钠注射液，四川科伦药业股份有限公司生产，批号：20041022。
试验动物
健康Wistar大鼠48只，体重180－200g，雌雄兼用，由实验动物中心提供，动物合格证号：桂医动字第11005号。
动物饲养条件
空调控温，换气扇通风，光照12h/日，食固体混合饲料，饮自来水，按性别分笼群养，每天清扫笼舍一次，室温20-22oC，相对湿度50-60％。
试验方法
① 致敏：选取健康大鼠24只，随机分为4组，每组6只：苦木注射液大剂量组（1.125mg/kg）、苦木注射液小剂量组（0.56mg/kg）、阳性对照组（10％鸡蛋清液，0.15ml/100g）、空白对照组（0.9％氯化钠注射液，0.15ml/100g）。实验室适应饲养5天后开始试验，按无菌操作，苦木注射液组肌肉注射苦木注射液0.15ml/100g，阳性对照组同法注射新鲜10％鸡蛋清液0.15ml/100g，空白对照组同法注射0.9％氯化钠注射液0.15ml/100g。隔日致敏一次，共5次。
② 制备血清：各组末次致敏后10天，挖眼球采血，低速离心，制备抗血清，置冰箱备用。
③ 大鼠脱毛：选取健康大鼠24只，随机分为4组，每组6只：苦木注射液大剂量组（1.125mg/kg）、苦木注射液小剂量组（0.56mg/kg）、阳性对照组（10％鸡蛋清液，0.15ml/100g）、空白对照组（0.9％氯化钠注射液，0.15ml/100g）。实验室适应饲养5天后可以用来做试验。试验前一天，用10％硫化钠溶液（先用20％水溶解，再加乙醇至刻度）脱毛，对各组大鼠进行脱毛。
④试验过程：将各组含IgE的抗血清分别用生理盐水稀释成不同倍数（1：10，1：30，1：50稀释度），在动物背部脊柱两侧脱毛区用记号笔划直径1厘米，相距1厘米，左右对称的六个圈（见附图1），依次由前向后皮内注射各对应组的抗血清（见附图2），48小时后，各组动物进行抗原攻击，静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原（含0.5％的伊文思蓝染料）（见附图3），30分钟后将动物处死，剖取背部皮肤，铺平后测量皮肤内侧的蓝色反应斑直径，同时拍摄照片，结果见附图4（正常皮肤）、附图5（阴性组皮肤）、附图6（阳性组皮肤）、附图7（大剂量组皮肤）。
⑤ 评价方法：固定的血清稀释倍数后以色斑的大小为指标。
试验结果
苦木注射液组和阴性对照组均未出现被动皮过敏反应症状，而阳性组大鼠被动皮肤过敏反应症状明显，出现直径在5mm以上的蓝斑，呈阳性反应。试验结果见表4。
表4：苦木注射液对大鼠被动皮肤过敏反应蓝斑大小的影响
组别 动物数（只） 注射不同浓度血清各注射点的蓝色反应斑直径（mm）
浓度血清（1：10） 浓度血清（1：30） 浓度血清（1：50）
阴性组 6 0 0 0
阳性组 6 9.13±2.23 7.50±2.27 3.63±1.30
大剂量组 6 1.00±1.20 0.63±0.74 0.50±0.76
小剂量组 6 0.63±0.74 0.50±0.76 0.25±0.46
从表4可以看出，大剂量组高浓度血清蓝斑直径为1.00毫米，小于5毫米，阳性组在此浓度下血清蓝斑直径为9.13毫米，呈强阳性反应，说明该药被动皮过敏试验为阴性，临床应用安全。
结论
请问：不是圆形的斑如何分割计算面积再换算出直径呢？谢谢
如出现不规则图形，可将该图形分割为矩形、梯形、三角形等，分别按这些图行的面公式计算出面积，再相加起来，用圆的面积公式S＝πR2,计算出R，再用Rx2不就的到直径吗？
知道了，谢谢！
我前几天刚做过一遍,附个图看看:
问题？卵蛋白和小牛血清蛋白分子量很大，是否不容易透过血管壁，这样做为阳性药物如何激发PCA的阳性反应啊？ 2 1 2 下一页 尾页